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RNA綁定的DNA和蛋白相互作用: CHIRP

免疫共沉淀實驗(Chromatin Isolation by RNA Purification, CHIRP)是-種檢測體內與RNA綁定的DNA和蛋白相互作用的方法，可同時分析IncRNAcircRNA、蛋白及DNA三者互作關系。

CHIRP實驗意義

IncRNA可與蛋白質、DNA和RNA相互作用，實現多樣化功能，CHIRP可以探討IncRNA與其互作的DNA.蛋白質的功能與作用機制，是相關科學研究工作的有力工具。IncRNA的研究在表觀遺傳調控等生命活動中發揮重要作用，CHIRP是研究

IncRNA的重要技術手段，可在全基因組范圍內鑒定RNA與染色質的互作，并對其進行定性、定量及定位的分析。

CHIRP實驗原理

CHIRP (Chromatin Isolation by RNA Purification)是通過結合生物素的核酸探針，將目標RNA拉下來,與之共同作用的DNA染色體片段(DNA與蛋白質復合體)就會被吸附下來，后可以通過qRT-PCR. WB.測序分析和質譜分析等檢測RNA. DNA和蛋白質。

CHIRP的實驗流程

①探針設計:設計反義穿核苷酸探針:

②細胞培養;

③破碎細胞:

④生物素標記的DNA探針與RNA雜交;

⑤CHIRP;

⑥RNA、DNA及核酸結合蛋白提取; .

⑦分析檢測。,

結果展示

實驗完成周期及交付標準

1.實驗周期: 1-3個月

2.交付標準: CHIRP鑒定結果報告、分析報告、實驗報告(試劑、 耗材、實驗步驟)、原始數據等

實驗需與客戶確認的信息

1.目的基因與蛋白信息。

2.樣本類型與種屬

3.是否需要生信分析

參考文獻

[1]lyer S , Modali S D , Agarwal S K. The Long Non-Coding RNA MEG3 is an Epigenetic Determinant of OncogenicSignaling in Functional Pancreatic Neuroendocrine Tumor Cells[J]. Molecular and Cellular Biology, 2017:MCB.00278-17.

[2] Chu C , Chang H Y . Understanding RNA-Chromatin Interactions Using Chromatin Isolation by RNA Purification(ChIRP).[J]. Methods in Molecular Biology, 2016, 1480.

[3]ZhuJJ,FuHJ , Wu Y G , et al. Function of IncRNAs and approaches to IncRNA-protein interactions[J]. Science

China Life Sciences, 2013, 56(10):876-885.

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